Módszer a testtömeg, a zsír felhalmozódás és az adipocita méret csökkentésére

A jelen találmány eljárást ír le a testtömeg, a zsír felhalmozódása és az adipocita méret csökkentésére a Parabacteroides goldsteinii probiotikus baktérium beadásával. Ez a probiotikus baktérium ezért felhasználható állatok és emberek elhízásának kezelésére.

A legújabb CHANG GUNG BIOTECHNOLOGY CORP. Szabadalmak:

Ez az alkalmazás a tajvani szabadalmi bejelentés elsőbbségét igényli 106128174, aug. 2017. január 18, amelynek tartalmát itt hivatkozásként teljes egészében beépítjük.

A TALÁLMÁNY HÁTTERE 1. A találmány területe

A jelen találmány tárgya eljárás a testsúly, a zsír felhalmozódásának és az adipocita méretének csökkentésére túlsúlyos személyeknél a probiotikus baktérium beadásával Parabacteroides goldsteinii. Ez a baktérium tehát felhasználható az elhízás kezelésére.

2. A technika állása

Az elhízás előfordulása az elmúlt években nőtt, világméretű járványállapotot ért el. 2014-ben az Egészségügyi Világszervezet becslése szerint az emberi populáció 39% -a volt túlsúlyos (1,9 milliárd ember), és 13% -a elhízott (600 millió ember). Az elhízott személyek fokozott kockázatát mutatják számos egészségügyi probléma kialakulásának, köztük a magas vérnyomás, a szív- és érrendszeri betegségek, az osteoarthritis, a 2-es típusú diabetes mellitus és a rák. Ennek megfelelően az elhízás rontja az életminőséget, és idő előtti halálhoz vezethet. Míg a gének szerepet játszhatnak az elhízás kialakulásában, az elhízási járvány elsősorban a magas kalóriatartalmú étrendnek és a mozgásszegény életmódnak tulajdonítható. Az elhízás és szövődményei tehát életmódbeli változásokkal megelőzhetők.

Habár alacsony kalóriatartalmú étrendet és rendszeres testmozgást alkalmaznak a testsúly csökkentésére és az elhízás kezelésére, ezeket a megközelítéseket nehéz megvalósítani, és hatékonyságuk korlátozott, főként az adaptív fiziológiai mechanizmusok miatt, amelyek fenntartják az energiaraktárakat a szervezetben. A gyógyszerészeti gyógyszereket hosszú távú elhízáskezelésre engedélyezték (például orlisztát, fentermin/topiramát), de ezek gyakran súlyos mellékhatásokkal társulnak, amelyek korlátozzák a kezelés hatékonyságát és a betegek megfelelőségét. A súlycsökkentő műtét jelentős fogyáshoz vezet, de ez a beavatkozás nem alkalmas minden túlsúlyos egyén számára. Ezen okok miatt a testtömeg és a zsír felhalmozódásának biztonságos és hatékony csökkentését célzó alternatív stratégiák nagyon hasznosak lennének.

A találmány összefoglalása

A jelen találmány elsődleges célja eljárás kidolgozása a testtömeg, a zsír felhalmozódás és az adipocita méret csökkentésére, amely magában foglalja egy hatékony mennyiségű Parabacteroides goldsteinii baktérium egy rászoruló egyén számára.

A jelen találmány egyik megvalósítási módja szerint, P. goldsteinii egy élő baktérium.

A jelen találmány egyik megvalósítási módja szerint a P. goldsteinii a baktérium 0,001 CFU/kg és 5 × 10 18 CFU/testtömeg-kg között van naponta, és a tényleges P. goldsteinii a baktérium napi 6,1 × 10 9 CFU/egyed.

A jelen találmány egyik megvalósítási módja szerint a készítmény további hatóanyagot tartalmaz, és a hatóanyag legalább egy, a következők közül választott: fehérje, monoszacharid, diszacharid, oligoszacharid, poliszacharid, szénhidrát, aminosav, lipid, vitamin és kombinációk. annak.

A jelen találmány egyik megvalósítási módja szerint a készítmény más baktériumokat tartalmaz.

A jelen találmány egyik megvalósítási módja szerint a készítmény oldat, zselatin kapszula, lágy gél kapszula és préselt tabletta formájában van.

A jelen találmány egyik megvalósítási módja szerint a készítményt orálisan adjuk be az erre rászoruló alanynak.

Ennek megfelelően a találmány tárgya eljárás elhízás kezelésére P. goldsteinii; a baktérium csökkentheti a testtömeget, a zsír felhalmozódását és az adipocita méretét, hogy elérje az elhízás megelőzésének és kezelésének célját. Ezért a jelen találmány szerinti eljárás új stratégiát nyújt az elhízás megelőzésére és kezelésére.

RÖVID LEÍRÁS A RAJZOKRÓL

Az alábbi rajzok a jelen leírás részét képezik, és ide tartoznak a jelen találmány néhány aspektusának további bemutatására, amelyek jobban megérthetők ezen rajzok egy vagy több hivatkozásával, az itt bemutatott kiviteli alakok részletes leírásával kombinálva.

ÁBRA. A 7B. Ábra az epididymális adipocita méretének csökkenését mutatja P. goldsteinii kiegészítés HFD-vel táplált egerekben. Az egereket 8 héten keresztül kezeltük, ahogy a 3. ábra mutatja. 1. A statisztikai elemzést egyirányú Bonferroni post hoc ANOVA teszt alkalmazásával végeztük (****, P 8. ábra mutatja a P. goldsteinii HFD-vel táplált egerek napi energiafogyasztásának kiegészítése. Az egereket 8 héten keresztül kezeltük, ahogy a 3. ábra mutatja. 1. A statisztikai elemzést Bonferroni egyirányú post hoc ANOVA tesztjével végeztük (**, P A 9. ábra azt mutatja, hogy Parabacteroides merdae A pótlás nem csökkenti a HFD-vel táplált egerek testsúlyát. Az állatcsoportok standard eggyel etetett és PBS-sel kezelt egerekből állnak (Chow + PBS); HFD-vel etetett és PBS-sel kezelt egerek (HFD + PBS); és HFD-vel etetett és egerekkel kezelt egerek P. merdae (H1-1)+P. merdae). A bemutatott adatok átlag ± SEM értéket képviselnek. 8 hét elteltével a HFD + PBS egerek testtömege nem különbözött a HFD egerek testtömegétől+P. merdae csoportot a kétirányú ANOVA Bonferroni post hoc teszt alkalmazásával elemeztük.

ÁBRA. A 10. azt mutatja P. merdae nem képes csökkenteni a relatív testtömeg-változást a HFD-vel táplált egerekben. A kísérleteket és a statisztikai elemzéseket a 3. ábra szerint hajtottuk végre. 9. Nem észleltünk statisztikailag szignifikáns különbséget a HFD + PBS és a HFD testtömege között+P. merdae csoportok 8 hét után.

ÁBRA. A 11. ezt mutatja P. merdae nem befolyásolja a testtömeg-növekedést a HFD-vel táplált egerekben. Az állatkezeléseket a 3. ábra szerint hajtottuk végre. 9. 8 hetes etetés után a HFD + PBS-szel táplált egerek testtömege nem különbözött a HFD-vel táplált egerek testtömegétől+P. merdae. Az adatokat egyirányú ANOVA Bonferroni post hoc teszttel elemeztük.

ÁBRA. A 12. azt mutatja P. merdae nem befolyásolja a HFD-vel táplált egerek relatív testtömeg-növekedését. A kísérleteket a 3. ábra szerint hajtottuk végre. 9. A HFD + PBS-szel táplált egerek testtömege nem különbözött a HFD-vel táplált egerek testtömegétől+P. merdae 8 hét etetés után. Az adatokat egyirányú ANOVA Bonferroni post hoc teszttel elemeztük.

A KEDVEZMÉNYEZETT RÉSZLET RÉSZLETES LEÍRÁSA

A jelen találmány kiviteli alakjainak alábbi részletes leírásában hivatkozunk a mellékelt rajzokra, amelyek bemutatásra kerülnek azon konkrét kiviteli alakok szemléltetésére, amelyekben a jelen leírás alkalmazható. Ezeket a kiviteli alakokat azért biztosítjuk, hogy a szakemberek gyakorolhassák a jelen leírást. Magától értetődik, hogy más kiviteli alakok is alkalmazhatók, és a kiviteli alakok változtathatók anélkül, hogy eltérnénk a találmány oltalmi körétől. Az alábbi leírás tehát nem tekinthető a találmány oltalmi körét korlátozónak.

A jelen találmányban leírt „hatékony mennyiség” azt a baktériummennyiséget jelenti, amely csökkentheti a testtömeget, a zsír felhalmozódását és az adipocita méretet állatokban és emberekben. A hatásos mennyiség az organizmustól vagy a kezelt egyedtől függően változhat, de kísérleti úton meghatározható különféle technikák alkalmazásával, beleértve a dózisnövelési vizsgálatot.

A leírásban használt adatok olyan kísérleti értékeket képviselnek, amelyek ± 20%, előnyösen ± 10% és legelőnyösebben ± 5% tartományban változhatnak.

A jelen találmány eljárást nyújt a testtömeg, a zsír felhalmozódásának és az adipocita méretének csökkentésére, azzal jellemezve, hogy hatékony mennyiségű Parabacteroides goldsteinii baktérium egy rászoruló egyén számára. Az alábbi kísérletek bemutatják a P. goldsteinii a testtömeg, az epididymális és a szubkután zsír felhalmozódása, az adipocita mérete, az átlagos energiafogyasztás és a vér biokémiai markerei. Általában, P. goldsteinii baktérium adható emlősöknek és embereknek 0,001 CFU/kg és 5 × 10 18 CFU/kg közötti dózisban. A találmányt az alábbiakban részletesen ismertetjük.

A jelen találmányban élőben P. goldsteinii a baktérium hatékonyan képes kezelni az elhízást és csökkenteni a testtömeget, a zsír felhalmozódását és az adipocita méretét. Az P. goldsteinii A jelen találmány szerinti baktérium hozzáadható az erre rászoruló alany étrendjéhez gyógyszerként, italként, napi kiegészítőként vagy ételként anélkül, hogy jelentős életmódbeli változások, toxicitás vagy egyéb kedvezőtlen egészségi állapotok lépnének fel benne.

A jelen találmány szerint nyolc hetes C57BL/6Narl egereket szokásos chow-val (zsírból származó energia 13,5% -a; LabDiet 5001; LabDiet, USA) etetünk a kontrollcsoportban, vagy magas zsírtartalmú étrenddel (HFD) (az állatok 60% -a). zsírból származó energia; TestDiet 58Y1; TestDiet, USA) a kísérleti csoportban. Az egereket szintén naponta 200 μl oldattal kezeljük P. goldsteinii ATCC BAA-1180 törzs (2 × 10 6 CFU), P. merdae ATCC 43184 törzs (2x106 CFU) vagy PBS napi 8 héten át intragasztrikus szondával (n = 5 egér csoportonként). Az állatcsoportok (1) egerekből állnak, amelyeket standard chow-val etettek és PBS-sel (Chow + PBS) kezeltek; (2) egerek, amelyeket standard chow-val etettek és kezeltek P. goldsteinii (Ebéd+P. goldsteinii); (3) HFD-vel etetett és PBS-sel kezelt egerek (HFD + PBS); (4) HFD-vel etetett és kezelt egerek P. goldsteinii (HFD+P. goldsteinii); és (5) HFD-vel etetett és kezelt egerek P. merdae (HFD+P. merdae).

1. példa Hatásai P. goldsteinii Baktérium a testtömegen, a zsír felhalmozódásán és az adipocita méretén HFD-vel táplált egerekben

Ábrák. Az 1–7 P. goldsteinii A találmány szerinti eljárás a chow-táplált és a HFD-vel táplált egerek testtömegére, zsírszintjére és adipocita méretére vonatkozik. A HFD-vel történő etetés megnövelte a testtömeget, a zsírszintet és az adipocita méretet a chow-val való etetéshez képest (1-7. ÁBRA). Nevezetesen a HFD-vel kezelt egerek+P. goldsteinii az abszolút és relatív testtömeg (1. és 2. ábra), az abszolút és relatív testtömeg-növekedés (3. és 4. ábra), az epididymális zsír (5. ábra), a szubkután zsír (6. ábra) és az adipocita méret (ábra 7A és 7B) összehasonlítva a HFD-vel táplált egerekkel. Nevezetesen, P. goldsteinii a kiegészítés 6,2 g-kal csökkentette a HFD-vel táplált egerek testtömegét a HFD csoporthoz képest (1. ábra), ami a testtömeg 22,5% -os csökkenését jelenti (2. ábra).

Amint azt a 2. ábra mutatja. 1-7, P. goldsteinii csökkentheti a testtömeget, a zsír felhalmozódását és az adipocita méretet a HFD-vel táplált egerekben. Ezen eredmények alapján a tényleges mennyiség P. goldsteinii az elhízás elleni hatások előidézéséhez 23 g átlagos testtömegű egereknél 8,7 × 107 CFU/kg naponta, 8 héten keresztül. Ennek megfelelően a tényleges mennyiség P. goldsteinii amely hasonló elhízás-ellenes hatást váltana ki 70 kg átlagos testsúlyú embernél, becslések szerint napi 6,1 × 10 9 CFU/egyed.

2. példa Hatásai P. goldsteinii Baktérium kezelés átlagos energiafogyasztás esetén HFD-vel táplált egerekben

ÁBRA. A 8. ábra a P. goldsteinii a chow-táplált és a HFD-vel táplált egerek átlagos energiafogyasztása. Míg a HFD-PBS csoport magasabb átlagos energiafogyasztási szintet mutatott, mint a Chow + PBS és a Chow+P. goldsteinii csoportok, a P. goldsteinii kezelt csoport nem befolyásolta a HFD-vel táplált egerek átlagos energiafogyasztását. Ezek az eredmények arra utalnak, hogy a P. goldsteinii a kezelés nem befolyásolta az étvágyat.

3. példa Hatásai P. goldsteinii Baktériumok kezelése vér biokémiai paraméterein Chow-Fed egerekben

A jelen találmány a hatások hiányát tárja fel P. goldsteinii a vér biokémiai paramétereinek kezelése chow-vel táplált egerekben. A vizsgált vérbiokémiai paraméterek közé tartoznak a májfunkciók értékelésére használt paraméterek, például az aszpartát-transzamináz (AST) és az alanin-transzamináz (ALT) enzimek, valamint a vesefunkciók értékelésére használt vérbiokémiai paraméterek, például a vér karbamid-nitrogénje (BUN). és a kreatinin. A vér biokémiai paramétereit biokémiai analizátorral (Hitachi 7080, Hitachi, Japán) követtük nyomon. Amint az 1. táblázat mutatja, nem észleltünk statisztikai különbségeket sem a PBS-sel, sem a PBS-sel kezelt Chow-vel táplált egerek vérbiokémiai paraméterei között. P. goldsteinii, jelezve azt P. goldsteinii ilyen körülmények között nem befolyásolta a máj vagy a vese működését.

1. összehasonlítható példa Egyéb hatásai Parabacteroides Baktériumfajok a testsúlyon és a testtömeg-növekedésen a HFD-vel táplált egerekben

A jelen találmány az alábbiak hatásait ismerteti P. merdae, egy másik faja Parabacteroides nemzetség, amelyet negatív kontrollként alkalmaztak a chow-vel táplált és HFD-vel táplált egerek testsúlyára. 8 hét etetés után, P. merdae a kiegészítés nem csökkentette az abszolút testtömeget (9. ábra), a relatív testtömeg-változást (10. ábra), az abszolút testtömeg-növekedést (11. ábra) és a relatív testtömeg-növekedést (12. ábra) HFD-vel táplált egerekben. Más szavakkal, a HFD egerei+P. merdae csoport nem mutatott statisztikailag szignifikáns különbséget az említett testtömeg-paraméterekben a HFD + PBS-sel kezelt egerekhez képest (9-12. ábrák). Ezek az eredmények azt mutatják, hogy az P. goldsteinii nem általános jellemzője a Parabacteroides nemzetség, de csak a fajra korlátozódik P. goldsteinii.

A találmány tárgya eljárás elhízás kezelésére probiotikus baktérium alkalmazásával P. goldsteinii. Az P. goldsteinii a baktérium csökkentheti a testtömeget, a zsír felhalmozódását és az adipocita méretét állatokban és emberekben. Míg sokan Parabacteroides fajok léteznek (pl., P. merdae), a találmány feltárja, hogy nem minden Parabacteroides fajok elhízás elleni hatást fejtenek ki a HFD-vel táplált egerekben. Ezért a jelen találmány új stratégiát nyújt a testtömeg kezelésére, a fogyás előidézésére és az emberekben a zsír felhalmozódásának csökkentésére. Ennek a stratégiának nyilvánvalóan potenciális kereskedelmi alkalmazásai vannak, tekintettel a piacon rendelkezésre álló hatalmas mennyiségű termékre és kezelésre a testtömeg csökkentése vagy az optimális testsúly és általános egészségi állapot fenntartása érdekében.

Noha a jelen találmányt az előnyös kiviteli alakokra hivatkozva írták le, a szakember számára nyilvánvaló, hogy különféle módosításokat és formai és részletességi változtatásokat lehet végrehajtani anélkül, hogy eltérnénk a jelen találmány oltalmi körétől. mellékelt követelések.

Követelések

1. Eljárás magas zsírtartalmú étrendben lévő alany testtömegének, zsír felhalmozódásának és adipocita méretének csökkentésére, azzal jellemezve, hogy hatékony mennyiségű Parabacteroides goldsteinii baktériumot tartalmazó készítményt adunk az alanynak.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a Parabacteroides goldsteinii baktérium élő baktérium.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, ahol a Parabacteroides goldsteinii baktérium tényleges mennyisége 0,001 CFU/kg és 5 × 1018 CFU/testtömeg kg között van naponta.

2. Az 1. igénypont szerinti eljárás, ahol a Parabacteroides goldsteinii baktérium tényleges mennyisége 6,1 × 109 CFU/nap.

5. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a készítmény további hatóanyagot is tartalmaz.

6. Az 5. igénypont szerinti eljárás, ahol a további hatóanyag legalább egy, a következők közül választott: fehérje, monoszacharid, diszacharid, oligoszacharid, poliszacharid, szénhidrát, aminosav, lipid, vitamin és ezek kombinációi.

7. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a készítmény más baktériumokat is tartalmaz.

8. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a készítmény oldat, zselatin kapszula, lágy gél kapszula vagy préselt tabletta formájában van.

9. Az 1. igénypont szerinti eljárás, azzal jellemezve, hogy a készítményt orálisan adjuk be az alanynak.