Az akut egy cigaretta dohányzás csökkenti a nyálban a Ghrelin-hormont: kísérleti tanulmány

1 Alkalmazott Orvostudományi Főiskola, Dammami Egyetem, Al-Khobar 31441, Szaúd-Arábia

2 Orvosi Rehabilitációs Tudományok Főiskolája, Taibah Egyetem, Al-Madinah Al-Munawwarah 21423, Szaúd-Arábia

Absztrakt

A cigarettázás általában súlycsökkenéssel jár, és ezeknek a súlyváltozásoknak a mechanizmusai még mindig megfoghatatlanok. A Ghrelin egy peptidhormon, amely neuroendokrin módon stimulálja az éhséget és az étkezési vágyat. A ghrelint a nyál is kiválasztja, valószínűleg az étel ízének fokozása érdekében. A jelenlegi tanulmányban az akut cigarettadohányzás közvetlen hatását teszteltük a nyálban található összes ghrelinre. Mód. Vér- és nyálmintákat vettünk 30 egészséges, nemdohányzó férfi önkéntestől egy cigarettafüst előtt és után. Az összes ghrelint a szérumban és a nyálban ELISA-alapú módszerrel mértük. Eredmények. Az adatok a nyál ghrelin dohányzás után statisztikailag szignifikáns csökkenését mutatták

. A szérumban a dohányzás előtt és után sem változott a teljes ghrelin szint

. Ezenkívül pozitív korrelációt figyeltek meg a szérum és a nyál ghrelin között a dohányzás előtt

; ez az összefüggés azonban a dohányzás után elveszett

és . Következtetés. Az egy cigaretta akut dohányzása negatívan befolyásolhatja a nyál ghrelinszintjét, ami hozzájárulhat a dohányzók unalmas ételízéhez.

1. Bemutatkozás

A cigarettázás világszerte gyakori és az egyik legnagyobb egészségügyi probléma. A krónikus dohányosok gyakran étvágytalanságot, kóros ételízlést és fogyást szenvednek [1, 2]. Ezen állapotok lehetséges mechanizmusai mind a dohányzás metabolikus hatásaival, mind pedig a nikotin, a füstben található fő addiktív komponens étvágyra gyakorolt neurológiai hatásaival kapcsolatosak [3]. Kimutatták, hogy a cigarettázás növeli az anyagcserét és az energiafelhasználást, és csökkenti a kalóriabevitelt [4, 5]. Mindez negatív energiamérleget és végül fogyást eredményezhet. Beszámoltak arról is, hogy a cigarettafüstnek való kitettség étvágytalanságot okoz egerek központi hipotalamusz mechanizmusai révén [6, 7]. Ezenkívül kimutatták, hogy az emberekben végzett nikotinkezelés anorexiás hatásokat és táplálékkorlátozásokat is okoz, miközben pozitívan korrelál a teltségérzettel [8, 9]. Másrészt a dohányzásról való leszokás zsírlerakódást és súlygyarapodást okoz [10–12]. Bár világos tehát, hogy a cigarettázás manipulálhatja a testsúlyt, a pontos mechanizmusok még mindig nem tisztázottak.

A ghrelin étvágyhormon egy 28 aminosavból álló acilezett polipeptid, amely a gyomor falának oxyntikus sejtjeiből választódik ki. Elismerték egy árva G-fehérjéhez kapcsolt receptor természetes ligandumának, az úgynevezett növekedési hormon szekretagóg receptornak (GHS-R) [13]. A Ghrelin adagolása étvágyat, táplálékfelvételt és súlygyarapodást vált ki az emberekben [14, 15]. A szisztémás szekréciótól eltekintve a grelint a parotid és submandibularis nyálmirigyek [16, 17], valamint az ízlelőbimbó sejtjei termelik és szabadítják fel. A nyálban található ghrelin pontos funkciója további vizsgálatokat igényel; ez a nyálszekréció azonban sugallja a ghrelin közvetlen moduláló szerepét az ízlelőbimbó sejtjein, amelyek jelzik és működnek, ami az ételízlés és az étkezés utáni étvágy fokozásához vezethet [18].

Ebben a tanulmányban megvizsgáltuk az akut cigarettadohányzás közvetlen hatását a nyálban található ghrelin hormonra annak érdekében, hogy további kapcsolatot tudjunk megállapítani a cigarettázás, az étel zavara és az étvágycsökkenés között.

2. Tantárgyak és módszerek

2.1. Tárgyak

30 férfi önkéntes hallgató (18–25 éves korosztály) vett részt ebben a vizsgálatban. Minden résztvevőt arra kértek, hogy írja alá a helyi etikai jóváhagyáshoz szükséges hozzájárulási űrlapot, és ellenőrizze a pulzusszámot, a hőmérsékletet, a vérnyomást, a testtömeg-indexet (BMI) és a glükózszintet. Egy kérdőívet dolgoztak ki a következő kizárási kritériumok bármelyikének kizárására: elhízás (BMI ≥ 30), kórtörténet gyomor műtét, étkezési rendellenességek és diabetes mellitus.

2.2. Minták gyűjtése

Az éhomi vér- és nyálmintákat kezdetben mind a 30 alanyból összegyűjtötték. Ezután arra kérték őket, hogy egy 0,9 mg nikotint tartalmazó szűrt cigarettát öt percig szívjanak el, legalább 15 másodpercenként legalább 3 másodpercig tartó puffadással. 10 perccel később más vér- és nyálmintákat nyertünk. A vénás vért aszeptikus flebotomia technikával sima csövekben gyűjtöttük, a szérum felülúszót kinyertük és -80 ° C-on lefagyasztottuk, amíg a vizsgálatot elvégeztük. A nyálhoz a Versi.SAL1 nyálgyűjtő eszközt használták (Oasis diagnostics corporation, WA, USA). A résztvevőket arra utasították, hogy alaposan öblítsék ki a szájukat csapvízzel, helyezzék a Versi.SAL1 szivacsos részét közvetlenül a nyelv alá, és a nyak megkötésével serkentsék a nyálelválasztást, amíg a szivacs meg nem telik. A nyálat ezután tiszta, előmelegített, 1,5 Eppendorf-csövekbe helyeztük, és 10 percig centrifugáltuk 4000 x g-on és 4 ° C-on a sejttörmelék eltávolítása érdekében. A felülúszót ezután 1,5 Eppendorf-csőben kinyertük és -80 ° C-on tároltuk a vizsgálat elvégzéséig.

2.3. Ghrelin Assay

Az összes alany mintájában (szérum és nyál) a teljes ghrelint a humán ghrelin TSZ-ELISA 96 kútlemez készlet (TSZ-ELISA, MA, USA) alkalmazásával mértük. A vizsgálatot a gyártó eljárása szerint hajtották végre. Röviden, mindegyik mintát 10x hígítottuk a minta hígítójában és 50x μL-t három példányban vittük át a megfelelő üregekbe. A lemezt 30 percig inkubáltuk 37 ° C-on, majd HRP enzimmel jelzett antitestet adtunk hozzá 30 percig. Kromogén/szubsztrát oldatot adtunk az egyes mélyedésekhez a színfejlődés érdekében. A reakciót leállítottuk, és meghatároztuk a standard homokminták optikai sűrűségét (OD450 nm). A standardok abszorbancia értékeit kivontuk a nulla standard átlagértékéből, és grafikusan ábrázoltuk a megfelelő koncentrációikhoz képest, a GraphPad Prism szoftver (San Diego, Kalifornia, USA) által generált lineáris regressziós görbe illesztésével. Az ismeretlen koncentrációkat direkt interpolációval határoztuk meg ugyanazon szoftver segítségével.

2.4. Statisztikai analízis

Az adatok normál eloszlását először a normális eloszlás feltételezésének ellenőrzése céljából ellenőriztük. Mivel az adatokat ugyanazoktól a dohányzóktól származtatták a dohányzás előtt és után, valójában önkontrollálják egymást, hogy kiküszöböljék az alanyokon belüli variációkat. Az átlagok átlagát és standard hibáját (SEM) kiszámoltuk minden adathalmazra. Aztán egy páros diáké

-tesztet végeztünk az átlagok összehasonlítására 95% -os konfidencia intervallummal. A korrelációs elemzéshez kiszámolták a Pearson-féle korrelációs együttható () értékét. Az adatkezelés és a statisztikai elemzés a GraphPad Prism szoftverrel történt (San Diego, Kalifornia, USA).

3. Eredmények

3.1. Vér és nyál Ghrelin

A normalitási teszt bebizonyította, hogy az összes kapott adatot valójában normálisan osztották el. A szérum teljes ghrelin (éhgyomorra) átlag ± SEM értéke 67 ± 17 ng/ml, illetve 62 ± 24 ng/ml volt a dohányzás előtt és után. A két átlag teszt-összehasonlítása nem mutatott statisztikai különbséget a két átlag között () (1. ábra). A nyálban a ghrelin szintje átlagosan 42 ± 15 ng/ml, illetve 28 ± 14 ng/ml volt a dohányzás előtt és után. Ez utóbbi adatok a nyál ghrelinszintjének statisztikailag szignifikáns csökkenését mutatták dohányzás után ().

A vér és a nyál ghrelin szintjének összehasonlítása. Doboz- és bajuszdiagramok, amelyek a teljes ghrelinszintet mutatják a vérben (a) és a nyálban (b) egy cigarettafüst előtt és után. A bemutatott adatok geometriai átlaga ± SEM

3.2. A vér és a nyál Ghrelin kapcsolata

A vérben és a nyálban lévő ghrelin szint közötti összefüggés tesztelésére Pearson korrelációs együtthatót számoltak. A dohányzás előtt a vér és a nyál összes ghrelin értékét egymás ellen blottoltuk, és grafikusan ábrázoltuk (2. ábra). Az adatok Pearson-féle korrelációs együtthatót mutattak

és közepes pozitív korrelációt jelez a vér és a nyál teljes ghrelin között. Az egy cigaretta dohányzása után ugyanazon alanyoktól kapott adatok elemzése azonban nem mutatott statisztikailag szignifikáns lineáris összefüggést a vér és a nyál ghrelin között a

A vér és a nyál ghrelin szintje közötti kapcsolat. Dotdiagramok, amelyek pozitív összefüggést mutatnak a vér és a nyálas ghrelin között a dohányzás előtt (a). Azonban az akut egy cigaretta dohányzás után nem tapasztaltak összefüggést (b).

4. Megbeszélés

A vérben található sok biomolekula és hormon szintén jelen van a nyálban, és néha pozitív korrelációban vannak; vagyis amikor a vérszintjük megnő, a nyálban is megnő és fordítva. Ez a nyál használatát javasolta értékes betegmintának a vér helyett, mivel a nyálmintavétel könnyen elvégezhető, gyors és nem invazív technika [24–26]. Korábban közölt tanulmányokkal [16, 17, 27] összhangban adataink pozitív összefüggést mutattak egészséges emberekben a vér és a nyálghrelin között. Itt azonban beszámoltunk a dohányzás közvetlen hatásáról a nyál ghrelinre, függetlenül a vérben lévőtől. Ezért figyelembe kell venni a dohányzási állapotot, ha nyálat használnak mintaként a ghrelin vizsgálatokhoz.

A vér és a nyál teljes ghrelin közötti különbségek ellentmondásosak voltak a különböző jelentésekben; egyes tanulmányok kimutatták, hogy a vér ghrelinje magasabb, mint a nyálas ghrelin [16], és egyesek ennek ellenkezőjét mutatják [20, 27]. Ebben a tanulmányban azonban megmutattuk, hogy a szérum ghrelin általában magasabb, mint a nyálas ghrelin. Ezek a különbségek számos tényezőhöz kapcsolódhatnak, például egészségi állapothoz, étkezési szokásokhoz, regionális változásokhoz vagy alkalmazott technikához.

Bár ma már általánosan elfogadott, hogy a dohányzás fogyást okoz, a pontos mechanizmusok még mindig megfoghatatlanok. A ghrelin és más étvágyhormonok nem különböznek ezektől a súlyváltozásoktól. Itt megmutattuk, hogy a dohányzás akutan csökkenti a nyálgrelint egészséges nemdohányzóknál. Ez a hatás még hangsúlyosabb lehet a krónikus dohányosoknál, akik gyakrabban dohányoznak. A nyálghrelinnek az étel ízében betöltött fontos szerepének köszönhetően ez a hatás csökkentett táplálékbevitelhez vezethet. Ez további hozzájárulási tényezőt adhat a dohányosok súlyvesztéséért. Tudomásunk szerint ez az első eset, amikor ilyen csökkenést jelentenek; azonban további vizsgálatokra van szükség nagyobb mintamérettel.

Érdekkonfliktus

A szerzők kijelentik, hogy a cikk megjelenésével kapcsolatban nincs összeférhetetlenség.