Funkcionális cirkadián órára van szükség az emberi hasnyálmirigy-szigeti sejtek megfelelő inzulinszekréciójához

Hovatartozások

  • 1 Endokrinológia, cukorbetegség, magas vérnyomás és táplálkozás, Diabetes Központ, Orvostudományi Kar, Genfi Egyetem, Genf, Svájc.
  • 2 Genetikai Genetikai és Genomikai Intézet (iGE3), Genf, Svájc.
  • 3 Diabetes Center, UCSF, San Francisco, Kalifornia, USA.
  • 4 Sebészeti Osztály, Sejtek Elkülönítése és Transzplantációs Központ, Genfi Egyetemi Kórház, Genf, Svájc.
  • 5 Genetikai Orvostudományi és Fejlesztési Tanszék, Genfi Egyetem Orvostudományi Kar, Genf, Svájc.
  • 6 Svájci Bioinformatikai Intézet, Genf, Svájc.

Szerzői

Hovatartozások

  • 1 Endokrinológia, cukorbetegség, magas vérnyomás és táplálkozás, Diabetes Központ, Orvostudományi Kar, Genfi Egyetem, Genf, Svájc.
  • 2 Genetikai Genetikai és Genomikai Intézet (iGE3), Genf, Svájc.
  • 3 Diabetes Center, UCSF, San Francisco, Kalifornia, USA.
  • 4 Sebészeti Osztály, Sejtek Elkülönítése és Transzplantációs Központ, Genfi Egyetemi Kórház, Genf, Svájc.
  • 5 Genetikai Orvostudományi és Fejlesztési Tanszék, Genfi Egyetem Orvostudományi Kar, Genf, Svájc.
  • 6 Svájci Bioinformatikai Intézet, Genf, Svájc.

Absztrakt

Cél: A funkcionális humán szigetecske óra hatásának meghatározása az inzulin szekréciójára és a gén transzkripciójára.

szükség

Mód: Az emberi hasnyálmirigy-szigetek sejtjeiben hatékony cirkadián óra-megszakítást értek el a CLOCK kicsi, interferáló RNS által közvetített leütésével. A humán szigetek szekréciós funkcióját funkcionális cirkadián óra jelenlétében vagy hiányában értékeltük stimulált inzulinszekréciós vizsgálatokkal és a bazális inzulin szekréció folyamatos éjjel-nappal történő monitorozásával. A nagyszabású transzkripciós elemzést RNS szekvenálással, majd a kiválasztott célok kvantitatív RT-PCR analízisével hajtottuk végre.

Eredmények: A cirkadián óra megszakadása az akut és a krónikus glükóz-stimulált inzulinszekréció jelentős csökkenését eredményezte. Ezenkívül az in vitro szinkronizált humán szigetek sejtjeinek bazális inzulinszekréciója cirkadián mintát mutatott, amelyet az óra megszakadása zavart. Az RNS szekvenálás elemzése 352 transzkriptum szint változását javasolta a cirkadián óra megszakításakor. Közülük az inzulin szekréció útjának legfontosabb szabályozói (GNAQ, ATP1A1, ATP5G2, KCNJ11) és a granulátum érleléséhez és felszabadulásához szükséges átírások (VAMP3, STX6, SLC30A8) érintettek.

Következtetések: Az újonnan kifejlesztett kísérleti megközelítésünkkel az emberi hasnyálmirigy szigeti sejtjeinek hatékony órarendszer-megszakításához először mutatjuk be, hogy funkcionális β-sejt órára van szükség a megfelelő bazális és stimulált inzulin szekrécióhoz. Ezenkívül az óra megszakadása mély hatást gyakorol az emberi szigetek transzkripciójára, különösen az inzulin szekréciójában szerepet játszó génekre.

Kulcsszavak: RNS szekvenálás; cirkadián biolumineszcencia; cirkadián óra; emberi hasnyálmirigy-szigetecske; inzulin szekréció.