Nikotin önadagolása és a nikotinkeresés helyreállítása hím és nőstény patkányokban

Absztrakt

Háttér

A dohányfüggőség egy kiújuló rendellenesség, amely világszerte jelentős egészségügyi problémát jelent, és bizonyítékok arra utalnak, hogy a nikotin és a nikotinnal kapcsolatos ingerek eltérő szerepet játszanak a férfiak és a nők dohányzási viselkedésének fenntartásában. Míg a nikotin önadagolását alkalmazó dohányfüggőség állatmodelljei egyre szélesebb körben elterjedtek, a nikotinkeresésre való visszaesést kiváltó több tényező szisztematikus vizsgálata korlátozott volt. Itt megvizsgáltuk a nikotin önadagolását és az azt követő nikotinkeresést hím és nőstény Sprague-Dawley patkányokban az önadagolás és a visszaesés állatmodelljével.

Mód

A patkányok karját megnyomták a nikotinhoz (0,03 és 0,05 mg/kg/infúzió, IV) 15 napi 2 órás kezelés alatt, majd a kar válaszreakciójának kihalása következett be. Miután a válasz megszűnt, megvizsgáltuk a korábban nikotinnal párosított jelek (hang + fény), a szorongás hatású yohimbin (2,5 mg/kg, IP), a nikotin alap injekciójának (0,3 mg/kg, SC) vagy kombinációinak képességét. kábítószer + jelzéseket a nikotinkeresés helyreállításához.

Eredmények

A hímek és a nők egyaránt könnyen megszerezték a nikotin önadagolását, és mindkét nikotin dózisnál hasonló szintű válaszreakciót és bevitelt mutattak. A kihalást követően a korábban nikotinnal párosított jelzések vagy yohimbin, de önmagában a nikotin-primer hatásának való kitettség visszaállította a nikotinkeresést férfiaknál és nőknél. Sőt, nikotinnal párosított jelekkel kombinálva a yohimbin és a nikotin egyaránt fokozta a visszaállítást. A visszaállítási tesztek során nem figyeltek meg szignifikáns nemi különbségeket vagy ösztrikus ciklustól függő változásokat.

Következtetések

Ezek az eredmények azt bizonyítják, hogy többféle modalitással vissza lehet állítani a nikotin-keresést, és hogy a stressz vagy a nikotin nikotinnal kapcsolatos jelzéseinek való kitettség fokozhatja a nikotin-keresést.

1. Bemutatkozás

A dohányfüggőség kritikus egészségi problémát jelent, becslések szerint napi 1,3 milliárd dohányzót számlál világszerte (Guindon és Boisclair, 2003; Thun és da Costa e Silva, 2003). Annak ellenére, hogy az elmúlt négy évtizedben jelentősen csökkent a dohányzást fogyasztó népesség aránya, a dohányzás továbbra is a korai halálozás és a megbetegedések vezető, megelőzhető oka az Egyesült Államokban, amely évente 440 000 halálesetet okoz (Fellows et al., 2002) . A többi bántalmazáshoz hasonlóan a nikotinfüggőség hosszú távú kezelésének egyik legjelentősebb problémája a hosszú ideig tartó absztinencia után bekövetkező nagy visszaesés a drogkeresés és a drogfogyasztás után. Valójában a leszokó dohányosok többsége visszaesik (Fiore, 2000; Shiffman et al., 1998), és szinte az összes dohányos, aki egy kezdeti leszokási kísérlet után visszaesik, visszatér a rendszeres dohányzáshoz (Brandon és mtsai, 1990; Chornock és mtsai. al. al., 1992; Kenford és mtsai, 1994).

Három elsődleges tényezőről van szó, amely hozzájárul a nikotin relapszusához az emberekben: a nikotinnal kapcsolatos jelzések (Perkins et al., 1999; Perkins et al., 1994), a stressz (Brandon et al., 1990; Patton et al., 1997) és magának a gyógyszernek való kitettség (Chornock et al., 1992; Sofuoglu et al., 2005). Hasonlóképpen, ezeket a kiváltó tényezőket alkalmazták a kábítószer-kereső magatartáshoz való visszatérés állatmodelljeiben, különösen a krónikus nikotin-önadagolástól való kivonást követő kihalási/helyreállítási modellben, amelynek során a nikotinnal párosított ingereknek való kitettség (LeSage et al., 2004; Liu és mtsai, 2008; Liu és mtsai, 2006), láblökéses stressz (Buczek és mtsai, 1999; Martin-Garcia és mtsai, 2009; Yamada és Bruijnzeel, 2011; Zislis és mtsai, 2007), vagy nem kontingens a nikotin beadása (Le és mtsai, 2006; Martin-Garcia és mtsai, 2009; Shaham és mtsai, 1997; Shram és mtsai, 2008) visszaállítja a nikotinkeresést, amelyet egy korábban nikotinnal párosított karral reagálva mértek.

2. Anyagok és módszerek

2.1. Tárgyak

Idős párosítású hímeket (kezdeti súly 250–300 g, P59–67) és nőstényeket (kezdeti súly 175–225 g, P57–74) Sprague-Dawley patkányokat (Charles River Laboratories, Wilmington, MA, USA) külön-külön elhelyeztek. hőmérséklet- és páratartalmú viváriumok 12 órás világos-sötét ciklusban (világítás 06: 00-kor). Minden kísérleti eljárás 07:00 és 16:00 között történt. Az otthoni ketrecben az állatok ad libitum vízhez jutottak, és minden kísérlet időtartama alatt standard patkány-chow (Harlan, Indianapolis, IN, USA) ellenőrzött étrenden (20-25 g/nap) tartották őket. Valamennyi kísérleti eljárást a Dél-Karolinai Orvostudományi Egyetem Állattenyésztési és Felhasználási Bizottsága hagyta jóvá, és megfelelt a szövetségi irányelveknek, amelyeket a laboratóriumi állattenyésztési erőforrások élettudományi intézetének „Útmutató a laboratóriumi patkányok gondozásához és felhasználásához” ismertetnek., Nemzeti Kutatási Tanács.

2.2. Sebészet

A patkányokat ketamin-hidroklorid és xilazin (66, illetve 1,33 mg/kg, IP) és ekvezezin (4 mg/kg nátrium-pentobarbitál, 17 mg/kg klór-hidrát és 21,3 mg/kg magnézium-szulfát-heptahidrát keverékével) altattuk. 44% propilénglikolt, 10% etanol oldatot, IP) és nyaki katétereket helyezünk be és tartunk fent leírt módszerekkel (Reichel és mtsai., 2011). A katéter átjárhatóságának értékeléséhez a patkányok alkalmanként 0,1 ml IV infúziót kaptak metohexitális nátriumból (Eli Lilly, Indianapolis, IN, USA; 10 mg/ml 0,9% fiziológiás sóoldatban oldva), rövid hatású barbiturátból, amely gyorsan izomtónus intravénás alkalmazás esetén.

2.3. A nikotin önadagolása és kihalása

A patkányok a nikotinra szorultak a számítógépes adatgyűjtő programhoz kapcsolt szokásos önadagoló kamrákban (MED-PC, Med Associates Inc., St. Albans, VT, USA). A kamrákat két karral, a nikotin-páros (azaz aktív) kar fölött fehér ingerlámpával, hanggenerátorral és egy fehér házfénnyel látták el. Mindegyik kamra egy hangtompító fülkében volt, amely szellőzőventilátorral volt felszerelve.

2.4. A nikotinkeresés visszaállítása

2.5. Észrös ciklus figyelése

Az ösztrikus ciklus szakaszainak megállapítása céljából a hüvelyi lumen mintákat gyűjtöttük közvetlenül az öt helyreállítási teszt előtt és után. Annak érdekében azonban, hogy a nőstényeket a hüvelyi citológiai eljáráshoz hozzászokhassák, naponta mintákat vettek az egész kísérlet során. A hüvelyi lumen mintákat úgy gyűjtöttük, hogy 30 ml dupla desztillált vizet öblítettünk finoman, és a mintát mikropipetta és 100 µl pipetta hegyek segítségével extraháltuk. A mintákat üveglemezekre helyeztük, Quick-Dip Hematology Stain (Mercedes Medical, FL, USA) segítségével megfestettük, fénymikroszkóppal megvizsgáltuk (10-szeres nagyítás), majd az észter ciklus fázisait a korábban publikált kritériumok szerint osztályoztuk (Marcondes et al. ., 2002).

2.6. Adatelemzés

Vegyes tényezők ismételt mértékű varianciaanalízisét (ANOVA) alkalmazták a kar válaszreakcióinak és a nikotinbevitel (mg/kg) elemzésére a nikotin önadagolása (utolsó hét nap) és a kihalás (első hét nap) során, a szex és a foglalkozás között - illetve az alanyokon belüli tényezők. A visszahelyezéses teszteléshez háromutas ANOVA-kat használtak a nemre (férfi, nő), jelzésre (nincs jelzés, jelzés), gyógyszerre (vivőanyag, yohimbine, nikotin-alap) és észteres fázisra (proestrus, estrus, diestrus) adott válaszreakciók elemzésére. Adott esetben tényezőként I/II). A jelentős kölcsönhatásokat tovább vizsgálták ANOVA-k vagy adott esetben független t tesztek alkalmazásával. Az adatpontokat akkor szüntettük meg, ha azok 2,5 szórása meghaladta a csoport átlagát. Az összes post hoc elemzést Student-Newman-Keuls alkalmazásával végeztük, alfa értéke 0,05, és csak a szignifikáns F vagy t értékeket mutatjuk be.