28.08 A fibroblaszt növekedési faktor jele megváltoztatja a bél adaptációját a zebrafish rövid bél szindróma modellben

KA Holoyda 1, KA Schall 1, C. Lien 2, TC Grikscheit 1 1 Los Angeles-i gyermekkórház/The Saban Research Institute, Gyermeksebészeti Osztály, Los Angeles, Kalifornia, USA 2 Los Angeles-i gyermekkórház/The Saban Research Institute, Division Cardiothoracic Surgery, Los Angeles, Kalifornia, USA

Bevezetés: A fibroblaszt növekedési faktor (Fgf) szignalizáció kritikus fontosságú számos szerv, köztük a bél fejlődése szempontjából, a sejtproliferációban és a hám differenciálódásában játszott szerepe révén. Az Fgf receptor (Fgfr) expressziót a bél adaptációja során indukálták a bél hatalmas reszekcióját követően. Ennek az útnak az összetevői konzerválódnak az emberek és a zebrafish között. Az Fgf jelátvitel szerepe a felnőtt zebrafish short bél szindróma (SBS) modellben még nincs meghatározva. Feltételeztük, hogy az Fgf jelátvitel gátlása rontja a bél adaptációját a zebrafish SBS modellben.

Mód: Az IACUC jóváhagyásával az SBS kifejlődött felnőtt hsp70 hímben: dnfgfr1-GFP zebrafish. Ezeket hasonlítottuk az álműtétes zebrafish-hoz, amely egyedül laparotomián esett át. Az fgfr expressziójának csökkentése érdekében hőhatásokat alkalmaztunk ál-és SBS zebrafish-on 2 héten keresztül naponta (HS SBS n = 5, HS sham n = 4). Ezeket a csoportokat összehasonlítottuk hőhatással nem kezelt transzgénikus zebrafishal (NHS SBS n = 5, NHS sham n = 4). A zebrafish súlyokat a műtét idején és az áldozat előtt hetente kaptuk. A proximális bélt 2 hetesen gyűjtöttük be. H&E és Alcian kék festést végeztünk. Immunfluoreszcenciát végeztünk a BrdU és a TUNEL esetében. RT-qPCR-t hajtottunk végre az fgfr1 esetében. Megmértük a Villus hámkerületet (VEP), és egy vak, képzett megfigyelő ImageJ-vel kiszámította a BrdU (+), az Alcian blue (+) és a TUNEL (+) sejtek hemivillusonkénti százalékát. A szignifikancia meghatározásához Student T-tesztjét alkalmaztuk.