Az Y ′ elemek rad59-es megkönnyítése rövid telomerekkel késlelteti az eredet kezdetét

Társulás Marseille-i Rákkutató Központ (CRCM), U1068 Inserm, UMR7258 CNRS, Aix Marseille Egyetem, Institut Paoli-Calmettes, LNCC (Equipe labellisée), Marseille, Franciaország

Dmitrij Csurikov,
Ferose Charifi,
Marie-Noëlle Simon,
Vincent Gelli

Ábrák

Absztrakt

Szerző összefoglalása

Idézet: Churikov D, Charifi F, Simon M-N, Géli V (2014) Az Y ′ elemek rövid telomerek általi megszerzése Rad59-megkönnyíti a Senescence kezdetét. PLoS Genet 10 (11): e1004736. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1004736

Szerkesztő: Michael J. McEachern, a Georgia Egyetem, Amerikai Egyesült Államok

Fogadott: 2014. április 19 .; Elfogadott: 2014. szeptember 5 .; Közzétett: 2014. november 6

Adatok elérhetősége: A szerzők megerősítik, hogy az eredmények alapjául szolgáló összes adat korlátozás nélkül teljes mértékben elérhető. Minden releváns adat megtalálható a dokumentumban és a kiegészítő információkat tartalmazó fájlokban.

Finanszírozás: Ezt a munkát a „Ligue Nationale Contre le Cancer” és a „L'Institut National Du Cancer (INCA), a TELOCHROM program” támogatta. A DC-t a „La Recherche sur le Cancer Egyesület” (ARC) támogatta. A finanszírozóknak nem volt szerepük a tanulmányok tervezésében, adatgyűjtésben és elemzésben, a közzétételre vonatkozó döntésben vagy a kézirat elkészítésében.

Versenyző érdeklődési körök: A szerzők kijelentették, hogy nincsenek versengő érdekek.

Bevezetés

A telomerek a kromoszómák fizikai végein található nukleoprotein szerkezetek. Terminális elhelyezkedésük meghatározza két fő funkciójukat: a kromoszóma végeinek védelme az illegitim javítási reakcióktól és a terminális DNS elvesztésének megakadályozása akár lebomlás, akár hiányos replikáció miatt [1]. A Saccharomyces cerevisiae-ben az első funkciót elsősorban a Rap1 látja el, amely az NHEJ gátlásához a tandem telomer DNS ismétlését tekercseli [2], és az MRX által közvetített 3 'végi reszekció visszatartására Rif1 és Rif2 alkalmazza [3], [4], korlátozva ezzel HR tényezők toborzása és ellenőrzőpont jelzés [5]. A második funkciót az egyszálú, G-ban gazdag 3 'túlnyúláshoz kötött Cdc13 közvetíti a telomer szélső végén. A Cdc13 alternatív komplexeket képez Est1-gyel vagy Stn1-Ten1-gyel, hogy koordinálja a G-ben gazdag szál telomeráz által közvetített szintézisét a komplementer szál DNS polimeráz α szintézisével [6].

Az emlősökhöz hasonlóan a csökkent telomeráz aktivitású élesztősejtekben a telomerek az egyes sejtosztódásokkal fokozatosan lerövidülnek, amíg fel nem ismerik őket DNS károsodásként, és toboroznak Mec1 kinázt, amely irreverzibilis G2/M leállást indít el [7] - [9]. A sejtpopuláció szintjén a telomer diszfunkció krízisként jelentkezik, amikor a sejtek többsége visszafordíthatatlanul megáll a G2/M-ben [7]. A sejtek többsége elpusztul, de alacsony frekvencián túlélők jelennek meg, amelyek telomerjeiket rekombinációval tartják fenn [10], [11], ami azt jelenti, hogy a homológ rekombináció (HR) megkerülő útként szolgálhat az életképesség fenntartásához telomeráz hiányában.

Eredmények

A 60 bp felett lerövidült VII-L telomer instabillá válik és átmeneti leállást okoz

A rövid Y-elemek nélküli telomer feldolgozásának kezelésére telomeráz hiányában a helyspecifikus rekombinációs rendszert alkalmaztuk egyetlen telomer hirtelen rövidülésének előidézésére [31]. Ebben a rendszerben a Cre indukció a loxP helyek által határolt VII-L (TelVII-L) telomer alaprészének kivágását okozza (1A. Ábra). Telomeráz jelenlétében a rövidített telomer meghosszabbodik, amíg hossza vissza nem tér az egyensúlyba [32]. Annak megvizsgálására, hogy ez a telomer miként fog feldolgozni telomeráz hiányában, kombináltuk a TelVII-L hirtelen rövidülését a plazmid által hordozott EST2 indukálható deléciójával [33].