Izoterm kaloriméter (ITC)

Az izotermális titráló kalorimetria (ITC) két molekula kölcsönhatásának hőjét méri. Az ITC-ben egy "ligandumot" tartalmazó fecskendőt a "makromolekula" oldatát tartalmazó sejtbe titrálunk. A két elem kölcsönhatásában a hő felszabadul vagy elnyelődik. Amikor a sejtben lévő makromolekula telítetté válik hozzáadott ligandummal, a hőjel csökken, amíg csak a hígítás háttérhője figyelhető meg. Példa a biofizikai erőforrásban összegyűjtött ITC adatokra. A fehérjetanulmányok ITC alkalmazásának jó áttekintését Pierce és mtsai. A Keck Facility biofizikai erőforrása a MicroCal VP-ITC-jét "nyílt hozzáférésű" eszközként kínálja, amelyet képzett felhasználók használhatnak.

biofizikai

Edzés ütemezéséhez vegye fel a kapcsolatot Ewa Folta-Stogniew-val

Az ITC ütemezéséhez menjen az Ütemezőhöz

Az ITC oldatban lévő natív molekulákon végzi a mérést; nincs szükség módosításokra, és a mérés nem igényel semmilyen fogyóeszközt.

A mintakövetelményekre vonatkozó általános irányelv kinyomtatható a „Mintakövetelmények” részből (a MicroCal - az ITC eszköz gyártójának javaslata szerint).
A részletes minta-előkészítési útmutató az "ITC_minta_előkészítés" részben található. Az ITC-kísérlethez szükséges fehérje- és ligandumkoncentráció becslése a „Kísérleti megfontolások_ITC” részben ismertetett javaslatok alapján tehető meg.

Az árakért lásd a Díjak, a rendszer rendelkezésre állását pedig az Ütemezőhöz

A Biophysical Resource ITC műszerében 250 ul titrálási fecskendő található. A MINIMÁLIS követelmények összefoglalhatók (EGYSÉGES TITRÁLÁSHOZ):

(ha lehetséges, magasabb koncentrációt kell használni a jobb jel biztosításához)

Az ITC univerzális eszköz a kötési reakciók nyomon követésére, mivel az összes kötési kölcsönhatáshoz kapcsolódó univerzális hő/entalpia változásból származó kötődést méri. Az elemzést egyensúlyban, oldatfázisban hajtják végre, mindenféle jelölés és fluoreszcens vagy egyéb próba szükségessége nélkül. Egy ITC-kísérlet közvetlen információt nyújt a kötés termodinamikájáról. A kötési entalpia mérése közvetlenül történik, és ha az egyensúlyi kötési állandóval kombináljuk (szintén közvetlenül mérjük), akkor az entrópia változást eredményez. Az entalpia változásainak hőmérsékletfüggése megadja a hőteljesítményt, amely betekintést nyújt a kötés során eltemetett felületbe. Az ITC felhasználható a kölcsönhatásban lévő fajok közötti tömegarány meghatározására is; a végső komplexum abszolút sztöchiometriáját azonban más módszerekkel kell ellenőrizni.

Az edzés ütemezéséhez kérjük lépjen kapcsolatba: Ewa Folta-Stogniew

Kérjük, olvassa el a "Képzési csomagot" a képzés előtt.
Kérjük, vigye magával a "tanfolyamcsomagot" a tanfolyamra.
Teljes ITC kézikönyv és ThermoVac kézikönyv is rendelkezésre áll.

Az árakért lásd a Díjak, a rendszer rendelkezésre állását pedig az Ütemezőhöz

Az erőforrás első használói követik a foglalási és töltési protokollt; kérjük, töltse ki a Biofizikai erőforrás-felhasználási forma linket a bal oldali mezőbe, és e-mailben küldje el a teljesen kitöltött használati űrlapot Tárgy: "Biofizikai erőforrások felhasználása" nak nek Ewa Folta-Stogniew.

** Figyelem: Minden Mac-felhasználó, aki az "Acrobat" helyett az "Előnézet" lehetőséget használja, kérjük, mentse a PDF-eket az alábbiak szerint: 1. A "Fájl" legördülő menüben válassza a "Nyomtatás ..." lehetőséget. 2. Kattintson a "PDF" gombra a bal alsó sarokban. ablak. 3. A legördülő menüben válassza a "Mentés PDF-ként" lehetőséget. 4. Mentse a PDF fájlt. **